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細胞凋亡、損傷研究的利器
--Comet Assay(彗星試驗)及FLARE檢測試劑盒
Comet Assay Single Cell Gel Electrophoresis
(彗星試驗/單細胞凝膠電泳,SCGE)
單細胞凝膠電泳(Single-Cell Gel Electrophoresis, SCGE)又稱彗星試驗(Comet Assay)為一項較新的電泳技術,自成功地用於檢測DNA單鏈斷裂以來,經不斷地改進,已成為一種快速、靈敏和簡便地檢測DNA損傷地方法,廣泛地應用於DNA放射損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯的檢測、藥物的遺傳毒性評價和細胞凋亡鑒定等工作中。
原理:各種因素誘發細胞DNA損傷後會影響DNA的高級結構,使其超螺旋鬆散。這種細胞經過實驗中細胞原位裂解(堿裂解)、DNA解鏈等過程後,電泳時損傷的DNA從核中溢出,朝陽極方向泳動,產生一個尾狀帶,未損傷的DNA部分則保持球形,二者共同形成 "彗星"。在一定範圍內,"彗星"的長度(代表DNA遷移距離)和經螢光染色或銀染色後,"彗星"螢光強度或光密度(代表DNA的量)與DNA損傷程度相關,因此可以定量檢測單個細胞中的DNA損傷。
TREVIGEN公司提供以下三種CometAssay檢測試劑盒
產品種類
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CometAssay Kit
(螢光染色)
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CometAssay Silver Staining Kit(銀染)
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CometSlide™ HT
(高通量)
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染料
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SYBR® Green I核酸染料
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銀
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SYBR® Green I核酸染料
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檢測方式
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螢光顯微鏡
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光學顯微鏡
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螢光顯微鏡
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樣品處理數/玻片
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2個
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2個
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20個
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優點
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永久保存染色標本(而SYBR® Green I螢光染料易淬滅)
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快速、可靠地分析大量標本
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共同特點
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關鍵技術:獨有的、經特殊處理的CometSlide™玻片,可促使低熔點瓊脂糖粘附在玻片上,避免了傳統方法(需製備基底層瓊脂和預處理)的耗時和不可靠。因此具有以下優點:
1. 快速
2. 方便:將細胞加入低熔點Comet LMAgarose(瓊脂糖)-無需基底層或預處理,並吸移至CometSlide™玻片即可
3. 結果可靠
另外在每個CometSlide™玻片有一個疏水屏障,其有助於將細胞直接鋪在玻片上並可使用Trevigens DNA修復酶中的任何一種
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應用
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1. 檢測和定量DNA損傷
2. 快速、方便地鑒別凋亡細胞
3. 跟蹤DNA損傷
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相關產品:
目 錄 號
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產 品 名
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規 格
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CometSlide
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2 片
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4250-050-03
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CometSlide
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25片
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4250-200-03
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CometSlide
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100片
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4250-050-K
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CometAssay Kit
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50 Samples
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4254-200-K
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CometAssay Silver Staining Kit(銀染試劑)
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200 Samples
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4251-050-K
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CometAssay Silver Kit
(含4254-200-K銀染試劑)
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50 Samples
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4252-040-01
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CometAssay HT Slide
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2片
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4252-040-K
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CometAssay HT Sample Kit
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40 samples
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4252-200-01
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CometAssay HT Slide
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10 samples
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4252-500-01
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CometAssay HT Slide
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25 samples
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FLARE™ (Fragment Length Analysis using Repair Enzymes)Assay Kits
(使用修復酶的片段長度分析試劑盒)
用途:使用不同的DNA修復酶來檢測單個細胞中的DNA損傷類型
原理:與Comet Assay(彗星試驗)原理相同,不同點在於在檢測前加入DNA修復酶孵育來修復損傷的DNA,以確定DNA損傷類型。
用法:
誘導待檢測細胞損傷
將細胞浸埋在FLARE Slide(玻片)上的低熔點瓊脂糖內
裂解細胞並與DNA修復酶孵育
進行彗星電泳並分析
產品
TREVIGEN公司提供六種FLARE檢測試劑盒,分別含有六種DNA修復酶,即Fpg, Endonuclease III, hoGG1, T4-PDG, cv-PDG和UVDE。
每種FLARE檢測試劑盒分為完全試劑盒(FLARE Kit)和模組試劑盒(FLARE Module)兩種
FLARE Kit:包括所有檢測試劑及玻片,如修復酶、試劑、FLARE玻片及低熔點瓊脂糖等
FLARE Module:僅提供酶和緩衝液,無FLARE玻片和低熔點瓊脂糖等,因此需與TREVIGEN公司的Comet Assay Kit配合使用。
目錄號
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產品名
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所含DNA修復酶
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所識別的損傷
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4040-100-FK
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E. coli Fpg.
FLARE Kit
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Fpg(Formamidopyrimidine-DNAGlycosylase, 甲醯氨基嘧啶-DNA糖基化酶)
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8-oxoguanine, DNA containing formamidopyrimidine moieties
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4040-100-FM
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E. coli Fpg
FLARE Module
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4045-100-FK
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E. coli
Endonuclease III FLAREKit
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Endonuclease III(核酸內切酶III)
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Thymine glycol, 5,6-dihydrothymine,urea, 5-hydroxy-6-hydrothymine,5,6-dihydrouracil, alloxan,5-hydroxy-5-hydrouracil,uracil glycol,5-hydroxycylosine,5-hydroxyuracil, thymine ring saturated or fragmentation product
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4045-100-FM
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E. coli
Endonuclease III FLARE Module
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4130-100-FK
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hoGG1 FLARE Kit
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hoGG1(Human 8-oxo-Guanine DNA Glycosylase, 人 8-氧鳥嘌呤DNA糖基化酶)
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8-oxoguanine, DNA containing formamidopyrimidine moieties
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4130-100-FM
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hoGG1
FLARE Module
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4055-100-FK
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T4-PDG FLARE Kit
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T4-PDG(T4 phage pyrimidine dimer glycosylase,T4噬菌體嘧啶二聚體糖基化酶)
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Cis-syn isomers of cyclobutone pyrimidine dimers
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4055-100-FM
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T4-PDG
FLARE Module
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4065-100-FK
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cv-PDG FLARE Kit
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cv-PDG(chorella virus pyrimidine dimer glycosylase, chorella病毒嘧啶二聚體糖基化酶)
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Cis-syn and trans-syn isomers of cyclobutone pyrimidine dimers
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4065-100-FM
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cv-PDG
FLARE Module
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4100-100-FK
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S. pombe UVDE
FLARE Kit
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UVDE(Ultraviolet DNA Endonuclease,紫外線DNA核酸內切酶)
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cyclobutone pyrimidine dimers,(6-4) photoproducts
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4100-100-FM
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S. pombe UVDE
FLARE Module
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【供應廠商】萊恩生物科技有限公司
【公司電話】04-2523-9639
【業務專員】陳俊豪 0937-229803
【電子信箱】biolion0819@gmail.com
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